哈姆雷特第三幕第一场的主旨集中在对人生意义和价值的迷茫和探索，以及复仇与正义之间的道德斗争。哈姆雷特在这一场中发表了著名的“生存还是毁灭”（To be, or not to be）的独白，表达了他对生命意义的深刻思考和对死亡的恐惧。他在复仇的道路上表现出了矛盾和纠结的性格，时而充满了激情和决心，时而陷入了沮丧和消极，时而假装疯癫和愚蠢，时而保持清醒和理性。

此外，第三幕第一场还探讨了权力和权威的主题，以及人物之间的互动和悲剧叙事的展开。哈姆雷特对行动和不行动的犹豫和哲学思考，表达了他内心的深深沮丧以及复仇与正义之间的道德斗争。

综上所述，哈姆雷特第三幕第一场的主旨是通过主人公哈姆雷特的内心独白和行为，深刻探讨生存与毁灭、复仇与正义、权力与权威等哲学主题，反映了人类普遍面临的生存困境和道德选择。